伊紅染液是一種酸性生物染料 ，主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色 。為1%的水溶液。

伊紅染液使用說明：

1. 樣品處理

a) 對于石蠟切片：

二甲苯中脫蠟5-10分鐘。

換用新鮮的二甲苯，再脫蠟5-10分鐘。

無水乙醇5分鐘。

90%乙醇2分鐘。

70%乙醇2分鐘。

蒸餾水2分鐘。

b) 對于冰凍切片：

蒸餾水2分鐘。

c) 對于培養(yǎng)細(xì)胞：

用4%多聚甲醛固定10分鐘以上。

蒸餾水洗滌2分鐘。

換用新鮮的蒸餾水，再洗滌2分鐘。

2. 伊紅染色

對于上述處理好的樣品：

伊紅染色液染色染色30秒-2分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時(shí)間)。

此時(shí)，如果需要直接觀察，可以用70%乙醇洗滌2次。如需脫水、透明后封片按后續(xù)步驟進(jìn)行，70%乙醇洗滌后仍可按照后續(xù)步驟進(jìn)行脫水、透明和封片處理。

注：如果用于免疫組化等染色后的復(fù)染，可以參考上述步驟在其它染色完成后直接進(jìn)行伊紅染色。

3. 脫水、透明、封片或進(jìn)行其它染色

a) 脫水、透明、封片：

95%乙醇脫水2分鐘。

換用新鮮的95%乙醇再脫水2分鐘。

二甲苯透明5分鐘。

換用新鮮的二甲苯，再透明5分鐘。

用中性樹膠或其它封片劑封片。

顯微鏡下觀察，細(xì)胞漿呈粉紅色或紅色。

b) 進(jìn)行其它染色：

如果進(jìn)行免疫熒光染色，或進(jìn)行Hoechst等熒光染料的染色，在伊紅染色液染色后：

70％乙醇洗滌2次，每次2分鐘。

PBS或生理鹽水或TBS或TBST等用于免疫染色或熒光染料染色的溶液浸泡5分鐘。

然后就可以進(jìn)行免疫熒光染色或其它熒光染料的染色了。

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